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上海闪晶生物供应多肽合成技术服务

信息更新时间:2023-06-21 10:19:43 点击:12

主要用于抗体的制备、多肽疫苗、多肽微注射及对基因结构与功能关系的研究。

合成原理

当前化学合成多肽的方法主要有两种,即 Fmoc 和 t Boc ;由于 Fmoc 比 tBoc 存在更多优势,所以现在较流行的是 Fmoc 法。多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,合成方向是从 C 端(羧基端)向 N 端(氨基端)进行;过去多肽合成大多是在液相中进行,现在大多采用固相合成,从而大大的降低了每步产品提纯的难度;为了防止副反应的发生,合成柱和添加的氨基酸的侧链都是预先被保护的,只有羧基端是游离的,并且在反应之前必须先用化学试剂活化它。

多肽保存
冻干多肽可 -20℃ 保存或室温保存;溶液肽远比冻干形式不稳定,溶液应为中性 pH(pH5-7), -20℃ 保存的;为避免样品的反复冻融,最好分成小样存放。一份样品如果冻融后未用完,应扔掉不再使用,因为细菌的降解有时会成为溶液肽的麻烦,所以多肽应溶于无菌水或多肽溶液用 0.2μ M 滤膜过滤后保存。
对于含 Cys, Met orTrP 的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽极易被空气氧化,最好用惰性气体填充保存。另外含 Gln 或 Asn 的多肽也容易降解。

多肽溶解
大多数多肽的首选溶剂是超纯抽气水;稀乙酸或氨水分别对碱性或酸性多肽的溶解也很有帮助。如果这些方法度过后还不溶的多肽,建议用 DMF 、脲、 guanidiniam chloride 或 acetonitnle 来溶解,但这些溶剂可能对某些实验有副作用,所以我们建议设计多肽时要多加留意,如残基 Ala 、 Cys 、 Ile 、 Leu 、 Met 、 Phe 和 Val 都会增加多肽的溶解难度。

上海闪晶生物供应多肽合成技术服务

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