上海闪晶生物供应蛋白表达与纯化技术服务

步骤1. 目标基因全基因合成：

从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列。如果我们的cDNA文库中有这个基因，我们免费提供给客户。根据选用的表达系统对cDNA进行密码子优化，密码子优化。合成设计好的基因序列

步骤2. 目标基因亚克隆：

扩增并抽提含有目标基因的载体质粒。将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上。测序验证构建质粒的准确性。闪晶生物免费提供如下表达载体：

步骤3. E. coli表达菌株转化及筛选：

扩增并抽提构建好的表达质粒。将表达质粒转化到高效的E.Coli表达菌株中。至少挑选5个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。SDS-PAGE电泳检测培养后中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。可提供表达菌株：DH5α, Top10, JM115, BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, XL1 Blue, XL10 Golden, Rosetta-gami。

步骤4. 目标蛋白表达及纯化：

摇瓶培养1L重组细菌，诱导表达目标蛋白。通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。利用蛋白酶去除不需要的纯化标签，再纯化获得所需的目标蛋白（可选，构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点）。通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

本文主要围绕【蛋白表达与纯化】的产品服务特点进行详细介绍，通过对《上海闪晶生物供应蛋白表达与纯化技术服务》全方位的分析概要描述，以诚信为本合作共赢的理念打造更值得信赖的品牌！